中国茶预防龋病的实验研究

　　【摘要】　目的　探讨茶浸液中氟对变形链球菌(简称 变链菌)致龋作用的动物实验研究分析。方法　用致龋性食物和茶浸 液饲养接种了S.Sobrinus 6715菌株的大鼠磨牙，观察茶浸液对变链菌的生长及致龋作用影 响，设龙井茶(B组)、乌龙茶(C组)、涪陵红茶(D组)各实验组与双蒸馏水对照组(A组)比较。 结果　实验组与对照组牙菌斑指数和龋蚀指数有显著性差异，组间差 异顺序为D组＞C组＞B组＞A组。此抑菌程度与茶氟含量呈正相关关系。结论　本文验证了茶饮料的防龋效果及其安全性为氟防龋提供另一条可行途径。
　　【关键词】　中国茶　　大鼠　　防龋作用　　Streptococcus mutans

　　茶的防龋作用研究表明，茶叶中的氟和鞣酸可能是其防龋作用的主 要成份［1～3］。从动物实验发现，除氟之外茶中还有其他成份具有防龋作用［ 4］；绿茶中的氟与鞣酸等物质的协同作用增强了防龋作用［5］。本研究采用中国 主要产茶区的3种茶，观察其对经致龋饲料喂养和接种变链菌的鼠的防龋作用，并研究防龋 作用与茶中氟和鞣酸含量的关系。

材料和方法

　　1.茶浸液制备：将各组0.5g茶叶浸入50ml煮沸的双蒸水中，匀速搅拌5分钟 后再放置5分钟过滤取茶浸液。
　　2.氟和鞣酸浓度的测定：用TISAB缓冲液及氟离子电极测定了30种茶氟的含量。本研究选用 龙井茶、乌龙茶和四川涪陵红茶，测定了氟含量。采用Holf等的固定蛋白的方法测定鞣酸浓 度［6］。
　　3.动物模型：36只出生后15～17天的Spaguo-Dawby种大鼠，喂以饲料2000(日本配合饲料株 式会社)，加入四环素4mg/g和饮用水(每毫升加青霉素400U)。同时，每日以青霉素G0.1 ml(含400U)置入口腔，抑制鼠口腔中固有菌群的生长。在大鼠生长到18～22天时，将具有链 霉素抗性的Streptococcus Sobrinus 6715菌株(血清型g)悬浮于10ml消毒盐水制备1010CFU/ ml的悬浮液，连续5日，将含有100μl变链菌株6715的悬浮液接种在每只大鼠的磨牙牙龈部 。
　　4.实验分组：大鼠出生后的第18天，将36只鼠随机分为四组，每组9只，A组为对照组，B组( 龙井茶)、C组(乌龙茶)、D组(涪陵江茶)为实验组。喂以致龋食物2000［7］。该饲料 主要成分是蔗糖，同时给与实验茶和对照双蒸水。
　　5.细菌计数：在接种Streptococcus Sobrinus 6715［8］第14、28、49天用消毒棉拭 子在鼠磨牙的颊面和牙合面按统一的方法擦拭菌 斑。将棉拭子放在1ml消毒盐水试管中摇匀后，取悬浮液涂布于含链霉素(500mg/ml)的M-S培 养平板，37℃培养72小时，计算平板的检出菌落数［9］。
　　6.菌斑及龋蚀程度检测：出生77天后的大鼠被处死，取其颌骨。上颌牙用1.5%的藻红染 色，按Rogolati和Hotz方法计算牙菌斑指数［10］。将下颌骨软组织和沟裂部的食物 残渣去净后，再经超声波清洗处理，用1.5%藻红染色4小时，制作牙齿磨片。显微镜下 检测第1、2、3磨牙颊-舌面，牙合面和近中面 龋蚀状况。龋蚀程度按Keyes计算方法记录［11］。

结果

　　3种茶浸液中的氟含量和丹宁酸含量分别是：龙井茶：1.09ppm,0.177mg/ ml；乌龙茶：3.14ppm,0.155mg/ml；涪陵红茶：4.75ppm，0.190mg/ml。
　　实验期间，实验组及对照组鼠每日饮料、饲料消耗量与鼠体重的增加无显著性差异。
　　在鼠口腔中接种S.Sobrinus 6715菌株后，菌落数检出情况见表1。实验组及对照 组在第14天和第28天无明显差异。但第49天后，与对照组(A组)相比，B、C、D组的菌落数减 少。

表1　鼠在接种变链6715后不同时期菌落检出值